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科学研究

科研动态

生物质谱平台使用须知

---生物质谱平台使用须知

发表时间:2011-02-20
作者:本站编辑
        
    1. 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱Ultraflex III™ MALDI TOF /TOF
    MALDI-TOF-MS)是近年来发展起来的一种新型的软电离生物质谱。适用于混合物及生物大分子的测定。MALDI-TOF-MS具有灵敏度高、准确度高及分辨率高等特点,为生命科学等领域提供了一种强有力的分析测试手段。该平台是新一代标准模块化飞行时间质谱仪,具有smartbeam™激光技术,配有MALDI离子源、线性和反射操作模式、源后裂解(PSD)串联质谱和高能量碰撞诱导解离 (CID)。
     
    主要用途:
    结合磁珠即液体芯片用于从复杂体液发现潜在的生物标志物
    蛋白质样品分子量测定
    肽质量指纹图谱(Peptide Mass Fingerprinting, PMF)分析
    多肽序列测定
    蛋白质的磷酸化、糖基化等翻译后修饰分析
    寡核苷酸多态性分析
     
    2. 液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱仪micrOTOFQ II LC/MS QTOF
    micrOTOFQ II 属于四级杆-飞行时间串联质谱(Q-TOF MS)类质谱。其主要组成部分包括电喷雾离子漏斗源、四级杆、TOF质量分析器、注射泵和数据采集与处理部分。该质谱与液相色谱联用自动进样,适合于多肽的分离、检测与测序,可应用在大规模药物开发、蛋白质组学等新兴技术领域。
     
    主要用途:
    蛋白质样品分子量测定
    精确质量测定及元素组成分析
    肽质量指纹谱
    多肽序列测定
    蛋白质的磷酸化、糖基化等翻译后修饰分析
    与二维液相相联,可进行多肽的分离、检测与测序

    MALDI-TOF-TOF质谱检测项目及收费标准(试运行)
     
    院内
    院外
    分子量测定
    150元/样本
    300元/样本
    肽质量指纹图谱(含酶切)
    400元/样本
    800元/样本
    MS/MS蛋白鉴定
    600元/样本
    1200元/样本
    液体芯片生物标志物分析
    800元/样本
    1200元/样本
    普通酶切
    100元/样本
    150元/样本
    胶内酶切
    150元/样本
    200元/样本
    De novo 测序
    根据实际情况价格面议
     
     
    LC Q-TOF质谱检测项目及收费标准 (试运行)
     
    院内
    院外
    分子量测定
    150元/样本
    300元/样本
    LC-MS/MS鉴定蛋白质
    (胶内酶解产物)
    750元/样本
    1500元/样本
    LC-MS/MS鉴定蛋白质
    (复杂样本)
    根据复杂程度价格面议
     
     
     
     
     
     
    送样须知:
    蛋白样品鉴定:
    1.样品量:50pmol干粉或1ug/uL以上(一般测试)
    100pmol干粉或1ug/uL以上(MALDI串联质谱分析)
    2.盐含量:挥发性无机盐<20mM,请勿使用PBSSDS和尿素等质谱干扰物质;
    3.银染过程中不得使用戊二醛作为固定剂;
    4.电泳过程中,请操作者戴口罩、帽子、无粉手套,以防止角蛋白污染;
    5. 送样时,请提供样品信息,包括样品名称、胶图、分子量大小、种属等。
     
    生物标志物分析:
     
    1.适于分析各种体液(血液、尿液、胃液、前列腺液及乳头分泌液等)及蛋白提取液,蛋白提取液应统一进行蛋白定量。
    2.统一规范取样过程,样本的收集和保存方法如下:
       使用BD真空抽血管(不抗凝)清晨空腹抽血2-5ml,半小时内放入4℃冰箱保存,4℃3000转离心5分钟。取上清加入eppendorf管。再次3000转离心5分钟,0.5ml eppendorf管分装,20µl/管,放入-80℃保存,每个样本至少3管以上(以备重复检测)
    血清样本在离体4小时内,应完成离心、分装等过程,并放入-80℃保存。期间所有操作均在4℃以下进行,所有样本保证只冻融一次
    注:样本不能有溶血不能将下层的细胞吸入,不能吸入上层油脂;操作时不要戴有粉乳胶手套,以免滑石粉干扰对样品的检测
    3.样本应标记清楚,材料齐全
    4.实验耗材的统一 为保证样品的质量及条件的统一,对耗材要求如下:
    Pipet Tips(Axygen公司)
    eppendorf 管 (Axygen公司)
    BD真空抽血管(不抗凝)(BD公司)
    6.每周一至周五,请提前1-2周预约.